《贞子大战伽椰子》讲述了女大学生上野夏美（佐津川爱美饰）为父母准备结婚纪念日礼物，拜托好友仓桥有里（山本美月饰）将父母的结婚录像刻录成DVD。两人在购买中古录像机时，意外得到了一盘传说中的诅咒录影带。夏美观看录像后遭到贞子诅咒，她们只好向专门研究都市传说的森繁教授（甲本雅裕饰）求助，却没想到事态逐渐朝着无法预料的方向发展。
与此同时，高木铃花（玉城蒂娜饰）随父母搬到佐伯家的对面。附近发生的小学生失踪事件令她十分在意，也让她成为伽椰子和俊雄盯上的目标。为了破解两大女鬼的诅咒，异端法师常盘经藏（安藤政信饰）决定让贞子与伽椰子展开一场前所未有的恶鬼对决。
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