《我的小马驹：友谊大魔法第二季》讲述了小马暮光闪闪（TwilightSparkle）的故事。为了完成导师塞拉斯提娅公主（PrincessCelestia）交给她的任务，暮光闪闪带着助手斯穗龙（Spike）来到小马镇，开始学习友谊魔法。在那里，她结识了苹果杰克（Applejack）、瑞瑞（Rarity）、小蝶（Fluttershy）、云宝黛西（RainbowDash）和碧琪（PinkiePie）五位好友。五匹小马分别代表友谊中的不同元素，并在和谐水晶（ElementsofHarmony）中承担着重要的关键角色。此后，暮光闪闪与新朋友们一起经历了丰富有趣的日常生活。到了第四季，暮光闪闪和她的五位朋友从第四集开始，并在之后持续记录属于她们的日记。
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